本文摘要:這篇 食品科學(xué)論文 通過色譜柱進(jìn)行長波掃描,根據(jù)波長確定色素的種類和量,完成多種合成色素的測(cè)定。食品合成色素的數(shù)量和種類越來越復(fù)雜,且食品的基質(zhì)也逐漸復(fù)雜,高效液相色譜法難以快速高效的完成色素檢測(cè),于是超高效液相色譜法應(yīng)運(yùn)而生,它能承受更大
這篇食品科學(xué)論文通過色譜柱進(jìn)行長波掃描,根據(jù)波長確定色素的種類和量,完成多種合成色素的測(cè)定。食品合成色素的數(shù)量和種類越來越復(fù)雜,且食品的基質(zhì)也逐漸復(fù)雜,高效液相色譜法難以快速高效的完成色素檢測(cè),于是超高效液相色譜法應(yīng)運(yùn)而生,它能承受更大的壓力、更大的流速,高效地完成食品合成色素的測(cè)定!江西食品工業(yè)》(季刊)創(chuàng)刊于1988年,由江西省食品工業(yè)協(xié)會(huì)主辦的食品工業(yè)刊物。宣傳發(fā)展食品工業(yè)的方針、政策,介紹國內(nèi)外食品工業(yè)生產(chǎn)的新技術(shù)、新工藝、新產(chǎn)品,總結(jié)推廣各地發(fā)展食品工業(yè)生產(chǎn)的新成果、新經(jīng)驗(yàn),為食品行業(yè)生產(chǎn)企業(yè)提供信息。
合成色素在食品中的應(yīng)用非常廣泛,不僅能保持食品的色澤,還能促進(jìn)人們的食欲,但合成色素不具備營養(yǎng),通常是由煤焦油提煉出的苯胺染料加工完成的,按照我國標(biāo)準(zhǔn)使用合成素色不影響食品安全。高效液相色譜方法是檢測(cè)食品中合成色素的重要方法,通過檢測(cè)來控制食品中合成色素的量和種類,保證食品的安全。合成色素的使用合成色素能保持食品的色澤,改善食品的性狀,促進(jìn)人們的食欲,因此現(xiàn)代食品加工中,合成色素的應(yīng)用非常廣泛。食品色素包括天然類的色素和人工合成色素兩種,合成色素的成本較低,容易上色且能調(diào)成任意顏色,在加工方面非常容易,因此合成色素的使用更普遍。合成色素沒有任何營養(yǎng)成分,且存在一定的毒性,可能導(dǎo)致消費(fèi)者腹瀉、癌變等,過量的合成色素危害消費(fèi)者的身體健康。
高效液相色譜檢測(cè)方法能高效地檢測(cè)出食品中合成色素的含量以及種類,從而加強(qiáng)對(duì)食品中合成色素的規(guī)范和管理,保障消費(fèi)者的權(quán)益。目前,國內(nèi)外對(duì)食品中合成色素檢測(cè)的方法主要有薄層色譜法、離子色譜法、電泳法以及高效液相色譜法等。我國食品中合成色素的標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范中,通常以高效液相色譜法作為主要檢測(cè)方法。但是我國目前以對(duì)糖果、果汁以及飲料等食品中的合成色素檢測(cè)為主,蛋白質(zhì)含量高的食品以及基質(zhì)復(fù)雜的食品中合成色素難以檢測(cè),合成色素與蛋白質(zhì)結(jié)合起來,難以提取和凈化,檢測(cè)的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性較差。隨著高效液相色譜法的不斷改進(jìn),食品中的合成色素檢測(cè)準(zhǔn)確性和精確性也越來越高。
高效液相色譜法
高效液相色譜法(HPLC)是食品合成色素檢測(cè)的重要方法,我國的多項(xiàng)著色劑檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定要求使用高效液相色譜法進(jìn)行測(cè)定。高效液相色譜法經(jīng)過了多年的發(fā)展和改進(jìn),從最初的飲料、果汁中合成色素的檢測(cè),到蛋白質(zhì)食品中合成色素的檢測(cè),該方法的檢測(cè)準(zhǔn)確性和精準(zhǔn)性越來越高,在食品中合成色素的檢測(cè)有著重要的作用。高效液相色譜法采用高壓輸液系統(tǒng),將不同性質(zhì)的溶劑或者不同比例的混合溶劑、緩沖溶液放入到色譜柱中,經(jīng)過樣品分離后,能夠借助檢測(cè)器對(duì)樣品中合成色素的種類、數(shù)量、成分等進(jìn)行檢測(cè),能完成對(duì)樣品的分析,且操作快速、簡潔,選擇性以及準(zhǔn)確性較高,分離能力也較好,能根據(jù)檢測(cè)的物質(zhì)性質(zhì)進(jìn)行選擇。
檢測(cè)的材料與方法
儀器設(shè)備高效液相色譜儀的主要儀器與設(shè)備包括紫外檢測(cè)器、高速離心機(jī)、渦旋振蕩器、低溫冰箱以及24位標(biāo)準(zhǔn)型固相萃取裝置等。樣品與試劑食品中合成色素檢測(cè)需要準(zhǔn)備好樣品材料以及各種檢測(cè)試劑。首先,要準(zhǔn)備無水乙醇、氨水、乙酸銨、甲醇、檸檬酸鈉和檸檬酸等分析純,我國各大試劑公司均有生產(chǎn)和出售。
在高效液相色譜檢測(cè)中,均使用超純水進(jìn)行檢測(cè),國內(nèi)外均有銷售。色素的準(zhǔn)備主要包括胭脂紅、赤蘚紅、誘惑紅、檸檬黃、日落黃、亮藍(lán)及靛藍(lán),我國上海安譜實(shí)驗(yàn)科技公司均有生產(chǎn)和出售。聚酰胺固相萃取柱,我國各大試劑公司也有生產(chǎn)出售。溶液的配制合成色素的檢測(cè)中主要溶液配制包括檸檬酸溶液、檸檬酸鈉溶液、乙酸銨溶液以及無水乙醇、檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液、標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液和混合標(biāo)準(zhǔn)使用液。
首先,檸檬酸溶液用21.01g檸檬酸混合1L水,充分?jǐn)嚢?檸檬酸鈉溶液選取29.41g檸檬酸鈉混合均勻1L水;無水乙醇溶液,70mL無水乙醇、20mL氨水以及10mL水充分混合;標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液中選擇上述色素各0.1g,放入100mL的容量瓶中,并且加水到100mL;混合標(biāo)準(zhǔn)使用液配制時(shí)選用上述溶液2mL,加入到100mL的水中,形成著色劑。
檢測(cè)方法第一,選取食品部分進(jìn)行勻漿處理;第二,選取5g樣品,放置30mL的離心管中,放入10mL無水乙醇與氨水和水的混合溶液中,進(jìn)行10分鐘的超聲處理,離心處理10分鐘,選取清液沉淀后繼續(xù)加入無水乙醇混合溶液,一共提取兩次;第三,選擇提取的清液,在-42℃的條件下分別冷凍0.5小時(shí)、1小時(shí)、3小時(shí)、5小時(shí)以及12小時(shí),冷凍后在冷凍離心機(jī)中離心5分鐘,隨后再取清液;第四,將清液取出后進(jìn)行高溫濃縮,將pH值調(diào)節(jié)到6~7后,可得到濃縮液;第五,通過聚酰胺固相萃取柱進(jìn)行濃縮液的過濾,采用檸檬酸-檸檬酸鈉溶液進(jìn)行清洗,隨后用無水乙醇與氨水混合液進(jìn)行洗脫優(yōu)化,將最初的0.3mL流出液處理掉,收集剩余的流出液,在50℃條件下進(jìn)行氮?dú)鉂饪s,濃縮到0.8mL以內(nèi),并且加入乙酸銨溶液0.2mL,溶解殘?jiān)瑴?zhǔn)備好的液體經(jīng)過水相微孔濾膜過濾,濾液進(jìn)行液相色譜測(cè)定;第六,色譜條件要進(jìn)行優(yōu)化,色譜柱的溫度保持在30℃,流動(dòng)相A相分別是20mmol/L乙酸銨溶液和20mmol/L的乙酸銨和氨水溶液,B為甲醇,進(jìn)行分離處理后,進(jìn)行全波長掃描,確定合成色素的波長;第七,制作基質(zhì)加標(biāo)曲線,選擇5g的空白樣品,放入30mL的離心管中,分別加入不同數(shù)量的合成著色劑,充分均勻后冷藏,隨后重復(fù)提取操作處理;最后,選擇不含合成色素的蝦丸和蟹棒等,制作成漿后,加入標(biāo)準(zhǔn)色素溶液,冷藏后分成6份樣品,標(biāo)準(zhǔn)處理后,進(jìn)行上述同樣的操作,樣品加標(biāo)回收率來表示檢測(cè)的準(zhǔn)確度,通過加標(biāo)濃度的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差來表示方法的精密度。
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