基于生物技術(shù)的農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全快速檢測(cè)方法研究進(jìn)展

　　摘 要： 農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全快速檢測(cè)技術(shù)樣品前處理簡(jiǎn)單， 對(duì)設(shè)備要求不高， 簡(jiǎn)便快速， 是當(dāng)前農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)管工作的重要技術(shù)支撐。 本文綜述了基于生物技術(shù)的農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全快速檢測(cè)方法的研究進(jìn)展， 包括酶抑制技術(shù)、 免疫學(xué)技術(shù) (酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定、 免疫層析、 生物芯片)、 生物傳感器技術(shù)和聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)， 并展望了其發(fā)展方向， 以期為后續(xù)研究提供參考和借鑒。

　　關(guān)鍵詞： 快速檢測(cè); 酶抑制技術(shù); 免疫學(xué)技術(shù); 生物傳感器; 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)

　　食品安全是國(guó)家的重大戰(zhàn)略需求。 我國(guó)的食品安全檢測(cè)于 2000 年左右開(kāi)始興起， 至今已基本建成了食品質(zhì)量安全保障體系和全過(guò)程監(jiān)管體系， 逐步健全了安全標(biāo)準(zhǔn)體系， 重大食品安全風(fēng)險(xiǎn)得到控制。 然而， 由于農(nóng)藥、 獸藥違規(guī)濫用等引發(fā)的農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全事件仍時(shí)有發(fā)生， 使消費(fèi)者對(duì)食品安全缺乏信心。農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)常用的是傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室大型儀器檢測(cè)方法。 隨著有關(guān)部門(mén)對(duì)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)管的重視， 安全抽檢任務(wù)日益加重; 而農(nóng)產(chǎn)品流通交易時(shí)間較短， 數(shù)量較大， 傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)周期長(zhǎng)， 難以及時(shí)發(fā)現(xiàn)和控制問(wèn)題， 因此對(duì)于農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全快速檢測(cè)方法的需求日益凸顯。

　　2015 年 10月 1 日起實(shí)施的新修訂的 《中華人民共和國(guó)食品安全法》， 對(duì)快速檢測(cè)方法的法律地位進(jìn)行了調(diào)整，從初步篩查轉(zhuǎn)變?yōu)槌椴闄z測(cè)， 抽查檢測(cè)的結(jié)果確定不符合食品安全標(biāo)準(zhǔn)的， 可以直接作為行政處罰的依據(jù)[1]。相較于大型儀器檢測(cè)方法， 快速檢測(cè)方法樣品前處理簡(jiǎn)單， 對(duì)設(shè)備要求不高， 分析方法簡(jiǎn)便、 快速， 能在較短時(shí)間內(nèi)完成， 尤其適用于現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)。 目前快速檢測(cè)方法的開(kāi)發(fā)主要基于生物技術(shù)、光譜學(xué)技術(shù)、 化學(xué)技術(shù)等[2～5]， 本文主要介紹近年來(lái)基于生物技術(shù)的農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全快速檢測(cè)方法的開(kāi)發(fā)、 研究現(xiàn)狀及應(yīng)用情況， 并展望了未來(lái)的研究方向與發(fā)展趨勢(shì)。

　　一、 酶抑制技術(shù)

　　酶抑制技術(shù)是基于某些物質(zhì)對(duì)酶的抑制作用而進(jìn)行分析的方法， 主要應(yīng)用于農(nóng)產(chǎn)品中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥殘留的檢測(cè)， 常用的酶類(lèi)包括膽堿酯酶和羧酸酯酶等， 具有簡(jiǎn)單、 快速、 靈敏， 對(duì)儀器設(shè)備要求不高且應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點(diǎn)。 YANG 等[6]建立了一種快速測(cè)定牛奶中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥殘留的酶抑制反應(yīng)體系 ， 農(nóng)藥的檢出限為0.5～1.0 mg/kg。 基于酶抑制技術(shù)的快速檢測(cè)方法，雖然存在準(zhǔn)確度不高、 選擇性差、 時(shí)有干擾等局限性， 但依然是目前有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)的主流方法。 研究人員也在嘗試?yán)�用多種方式， 優(yōu)化酶抑制技術(shù)以提高其相關(guān)產(chǎn)品的性能。JIN 等[7]改進(jìn)了乙酰膽堿酯酶抑制分析方法， 開(kāi)發(fā)了一種通過(guò)有機(jī)溶劑萃取結(jié)合自發(fā)性原位溶劑蒸發(fā)的紙基微流控分析系統(tǒng)， 使其分析性能得到了顯著提高。

　　WU 等[8～9]將酶抑制技術(shù)與金納米材料有機(jī)結(jié)合開(kāi)發(fā)了一種比色方法， 利用金顆粒在不同價(jià)態(tài)形式下呈現(xiàn)的顏色不同， 來(lái)指示有機(jī)磷農(nóng)藥的濃度， 在最佳條件下， 觀察到的最小比色濃度為 0.7mg/L， 大大提高了檢測(cè)靈敏度。 QING 等[10]同樣采用了基于金納米材料的酶抑制技術(shù)， 建立了一種可快速檢測(cè)有機(jī)磷農(nóng)藥的方法， 以三唑磷作為模型農(nóng)藥 進(jìn) 行 驗(yàn) 證 ， 在 最 優(yōu) 條 件 下 的 檢 測(cè) 限 為 4.69nmol/L。 這種利用金納米材料的高靈敏度， 對(duì)現(xiàn)有的酶抑制技術(shù)預(yù)處理方法進(jìn)行改進(jìn)優(yōu)化的方法， 在未來(lái)有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的快速檢測(cè)領(lǐng)域有較為廣闊的應(yīng)用前景[11]。

　　二、 免疫學(xué)技術(shù)

　　(一) 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法

　　酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定 (Enzyme linked immunosorbent assay， ELISA)法是目前常用的應(yīng)用免疫學(xué)技術(shù)的方法之一， 其基本原理是充分利用了抗原-抗體結(jié)合的特異性和酶高效催化底物的特性， 通過(guò)酶作用后顯色的顏色深淺來(lái)達(dá)到定性或定量檢測(cè)樣品中待測(cè)物的目的[12]。ELISA 主要包括直接競(jìng)爭(zhēng)法、 間接競(jìng)爭(zhēng)法和雙抗夾心法等， 具有操作簡(jiǎn)單、 相對(duì)成本低、 預(yù)處理速度快、 可以高通量分析等優(yōu)點(diǎn)[13]。 ZHANG 等[14]建立了一步間接競(jìng)爭(zhēng) ELISA 法， 用于快速、 特異地檢測(cè)動(dòng)物源性農(nóng)產(chǎn)品中的地克珠利殘留， 可在 50 min內(nèi)完成對(duì)樣品的分析。 LI 等[15]制備了特異性一致且親和力高的抗菌增效劑單克隆抗體， 并建立了間接競(jìng)爭(zhēng) ELISA 方法， 用于雞肉和牛奶中抗菌增效劑的 檢 測(cè) ， 檢出限分別可達(dá) 0.06 ～0.8 μg/kg 和0.05～0.6 μg/L。

　　YANEVA 等[16]制備了抗敵敵畏和對(duì)氧磷的綿羊多克隆抗體， 并在此基礎(chǔ)上建立了間接競(jìng)爭(zhēng) ELISA 法， 用于生鮮乳中敵敵畏和對(duì)氧磷殘留的快速篩查。 間接競(jìng)爭(zhēng)法需要使用酶標(biāo)二抗，操作步驟相對(duì)復(fù)雜， 相比較而言直接競(jìng)爭(zhēng)法更加快速便捷。 WU 等[17]建立了適用于氯霉素殘留檢測(cè)的直接競(jìng)爭(zhēng) ELISA 法， 通過(guò)方法學(xué)驗(yàn)證及實(shí)際樣品檢測(cè)， 證明此方法具有足夠的靈敏度用于檢測(cè)農(nóng)產(chǎn)品樣品中的氯霉素殘留。ELISA 法所使用的抗體， 包括通用抗體和廣譜抗體。 通用抗體的制備對(duì)于免疫原的設(shè)計(jì)要求較高， 且無(wú)法保證抗體對(duì)待測(cè)物具有一致的親和力;而廣譜抗體的制備， 雖然使用的是 “多半抗原策略”， 但所獲得的抗體對(duì)待測(cè)物親和力較低[18]。

　　因此， 基于抗原-抗體的 ELISA 方法存在一定的局限性， 需要開(kāi)發(fā)更易獲取、 高效穩(wěn)定、 特異性強(qiáng)的識(shí)別元件， 以彌補(bǔ)抗體制備技術(shù)的不足。 XIANG等[19]開(kāi)發(fā)了一種基于適配體的 ELISA 方法， 將適配體的生物識(shí)別功能與酶信號(hào)放大功能相結(jié)合， 用于檢測(cè)蔬菜、 水果中的水胺硫磷， 檢測(cè)限為 0.05ng/mL， 靈敏度優(yōu)于傳統(tǒng)的 ELISA 方 法。 WANG等[20]合成了一種分子印跡聚合物作為仿生抗體， 基于此開(kāi)發(fā)了可用于檢測(cè)動(dòng)物源性農(nóng)產(chǎn)品中恩諾沙星的 ELISA 方法， 檢測(cè)限為 1.1 ng/mL， 結(jié)果與高效液相色譜法測(cè)定結(jié)果一致。 適配體和分子印跡聚合物作為新型識(shí)別元件， 具有制備快速簡(jiǎn)單、 穩(wěn)定性強(qiáng)、 特異性好、 易于保存等優(yōu)點(diǎn)， 與 傳 統(tǒng) ELISA方法結(jié)合， 可擴(kuò)大檢測(cè)適用范圍。

　　(二) 免 疫 層 析 法

　　免 疫 層 析 (Immunochromatographicassay， ICA) 法是基于層析技術(shù)和 抗原-抗體特異性結(jié)合而發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)快速檢測(cè)技術(shù)， 具有操作簡(jiǎn)單、 檢測(cè)速度快、 成本較低、 高通量等優(yōu)點(diǎn)[21]。 其基本原理是將抗原或抗體固定在硝酸纖維素膜的檢測(cè)線(xiàn)上， 二抗固定在質(zhì)控線(xiàn)上， 在毛細(xì)管層析作用下， 標(biāo)記后的抗體與待測(cè)物隨樣本溶液在硝酸纖維素膜上流動(dòng)， 并與檢測(cè)線(xiàn)及質(zhì)控線(xiàn)上的抗原或抗體發(fā)生高特異性、 高親和性的免疫反應(yīng)， 通過(guò)檢測(cè)區(qū)域標(biāo)記抗體信號(hào)強(qiáng)弱的變化可對(duì)樣品中的待測(cè)物進(jìn)行定性、 半定量以及定量檢測(cè)[22]。隨著科技的發(fā)展， 用于標(biāo)記抗體的標(biāo)記物的種類(lèi)也呈現(xiàn)出多樣化發(fā)展， 包括膠體金、 熒光納米顆粒、 量子點(diǎn)、 上轉(zhuǎn)換發(fā)光顆粒等[23～26]。

　　其中， 膠體金是應(yīng)用最為廣泛的抗體標(biāo)記材料， 合成技術(shù)最為成熟， 是由氯金酸還原后聚合成的金顆粒形成帶負(fù)電的疏水膠溶液， 其顏色肉眼可見(jiàn)且穩(wěn)定性高[22～23]，基于此開(kāi)發(fā)的主要產(chǎn)品為膠體金免疫層析試紙條。如 WU 等[17]研發(fā)了可用于檢測(cè)食品樣品中氯霉素的免疫層析試紙條， 檢 測(cè) 限 為 0.5 ng/mL， 可 在 10min 內(nèi)完成檢測(cè)。

　　GAO 等[27]研究建立了一種適用于檢測(cè)雞肉樣品中金剛烷的 ICA 方法， 并與 ELISA方法進(jìn)行比較， 結(jié)果非常相似， 為現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)提供了一種有力工具�；�于傳統(tǒng)通用抗體的 ICA 方法在高通量檢測(cè)方面存在一定的局限性， 即一種產(chǎn)品只能檢測(cè)特定的一種參數(shù)。 近年來(lái)， 基于廣譜抗體的 ICA 方法開(kāi)發(fā)逐漸成為研究重點(diǎn)， 其可用于同時(shí)檢測(cè)多種參數(shù)。 GUO 等[28]開(kāi)發(fā)了一種可同時(shí)檢測(cè)雞胸肉中卡巴氧和喹賽多殘留的膠體金免疫層析試紙條， 檢測(cè)限分別為 2.92、 2.68 μg/kg， 并通過(guò)液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法進(jìn)行了驗(yàn)證。

　　HAN 等[29]研發(fā)了一種八聯(lián)側(cè)流免疫分析方法， 可同時(shí)對(duì)牛奶中喹諾酮類(lèi)、 四環(huán)素類(lèi)、 β-內(nèi)酰胺類(lèi)、 磺胺類(lèi)、 氯霉素、 鏈霉素、黃曲霉毒素 M1 和三聚氰胺 8 類(lèi)藥物殘留開(kāi)展定性或半定量分析， 檢測(cè)時(shí)間< 20 min。 WANG 等[30]利用熒光納米顆粒標(biāo)記的非特異性單克隆抗體建立了一種 ICA 方法， 可在 8 min 內(nèi)快速篩查豬肉中 7 種β-激動(dòng)劑， 檢測(cè)限<50 pg/g。 PENG 等[31]利用一種具有廣泛特異性的單克隆抗體， 開(kāi)發(fā)了可同時(shí)檢測(cè)32 種喹諾酮類(lèi)藥物的 ICA 方法， 檢出限為 0.1～10ng/mL。 然而， 受抗體親和性較低及成本較高的限制， 市售的此類(lèi)檢測(cè)產(chǎn)品較少， 應(yīng)用范圍不及傳統(tǒng)的 ICA 快速檢測(cè)產(chǎn)品。

　　(三) 生物芯片法

　　生物芯片法是 以 硅 芯 片、玻璃芯片或高分子聚合物薄片為載體， 利用 DNA或蛋白質(zhì)等生物大分子間特異性的相互作用對(duì)目標(biāo)分子進(jìn)行快速檢測(cè)的方法， 可實(shí)現(xiàn)對(duì)單一樣品中多種待測(cè)物的同時(shí)檢測(cè)， 主要包括免疫芯片法、 基因芯片法、 細(xì)胞芯片法等[32]。 LI 等[33]采用可視化微陣列技術(shù)開(kāi)發(fā)出了一種同時(shí)檢測(cè)牛奶中三聚氰胺、 頭孢氨芐和黃曲霉毒素 M1 的多殘留檢測(cè)技術(shù)， 檢測(cè)限分別為 16.31、 8.21、 0.21 ng/mL。

　　LAN 等[34]研發(fā)了一種可同時(shí)檢測(cè) 7 種農(nóng)藥 (三唑磷、 甲基對(duì)硫磷、 甲氰菊酯、 呋喃丹、 噻蟲(chóng)啉、 百菌清和多菌靈) 的生物芯片， 檢測(cè)限為 0.02～6.45 ng/mL。 趙穎等[35]建立了一種可同時(shí)檢測(cè)農(nóng)產(chǎn)品中毒死蜱等10 種農(nóng)藥多殘留的免疫芯片方法 ， 檢 測(cè) 限 可 達(dá)1.49～15.72 μg/L， 檢測(cè)過(guò)程僅需 1.5 h， 具有良好的實(shí)用價(jià)值。 由于生物芯片法具有高通量、 高效率的特性， 已成為一種很有前景的農(nóng)產(chǎn)品中危害物質(zhì)殘留檢測(cè)的工具[18]。 然而， 受限于生物芯片的制備工藝， 在樣品檢測(cè)分析中較難獲得對(duì)不同待測(cè)物的良好靈敏度， 且易于與其他類(lèi)似物質(zhì)發(fā)生交叉反應(yīng)， 因此在實(shí)際應(yīng)用中尚未得到廣泛應(yīng)用。

　　三、 生物傳感器技術(shù)

　　根據(jù)國(guó)際純粹與應(yīng)用化學(xué)聯(lián)合會(huì) (InternationalUnion of Pure and Applied Chemistry， IUPAC)的定義， 生物傳感器是指能夠?qū)⑸�物體內(nèi)分離的酶、 組織、 免疫系統(tǒng)、 細(xì)胞等介導(dǎo)的生化反應(yīng)轉(zhuǎn)化為電、 熱或光信號(hào)， 并通過(guò)信號(hào)的變化來(lái)檢測(cè)目標(biāo)化合物的設(shè)備[36]。 生物傳感器分為生物識(shí)別和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)兩部分， 根據(jù)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)方式的不同， 可分為光學(xué)生物傳感器、 化學(xué)生物傳感器、 機(jī)械生物傳感器等[2]。 使用生物傳感器進(jìn)行農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)，樣品不需要進(jìn)行復(fù)雜前處理， 靈敏度高、 選擇性好， 適用于農(nóng)藥殘留、 獸藥殘留及微生物的現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)。 STEVENSON 等[37]開(kāi)發(fā)了一種用于檢測(cè)肉類(lèi)樣品中頭孢噻呋殘留的電化學(xué)生物傳感器方法，可以在 15 min 內(nèi)完成檢測(cè)， 在火雞肉樣品中的檢測(cè)限為 10 ng/mL。

　　近年來(lái)， 隨著多種新型生物識(shí)別元件和轉(zhuǎn)導(dǎo)技術(shù)在生物傳感器開(kāi)發(fā)中的應(yīng)用， 使得生物傳感器性能不斷提高， 逐漸向小型化、 便攜化方向發(fā)展。 其中， 基于納米技術(shù)開(kāi)發(fā)的生物傳感器的研究最為廣泛， 在提高檢測(cè)可靠性和靈敏度方面發(fā)揮著重要作用[38～39]。 JIN 等[40]研究制備了一種基于超順磁性納米顆粒的生物傳感器， 并將其應(yīng)用于牛奶樣品中的沙 門(mén) 氏 菌 檢 測(cè)， 可 在 2 h 內(nèi) 準(zhǔn) 確 檢 測(cè) 到 低 至 104CFU/mL 的沙門(mén)氏菌。

　　LIN 等[41]報(bào)道了一種基于碳納米顆粒的適配體生物傳感器， 具有超靈敏和高選擇特性， 用于牛奶中卡那霉素殘留的快速檢測(cè)， 檢測(cè)限均<5.0×10-8 ng/mL。 MA 等[42]合成了鉑納米粒子錨定鋯基金屬有機(jī)骨架的納米復(fù)合材料， 并基于此制備了用于蔬菜水果中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留檢測(cè)的乙酰膽堿酯酶生物傳感器， 其檢測(cè)馬拉硫磷的檢測(cè)限為 4.9×10-15 mol/L。 此外， 基于適配體的生物傳感器的設(shè)計(jì)， 也為實(shí)現(xiàn)農(nóng)產(chǎn)品中污染物的現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)提供了一種有應(yīng)用前景的手段[43～44]。盡管有多種不同方法的融合為生物傳感器領(lǐng)域帶來(lái)了新的機(jī)遇， 但由于農(nóng)產(chǎn)品樣品本身的基質(zhì)復(fù)雜性， 一定程度上阻礙了其向更高特異性和靈敏度方向的發(fā)展， 還需要進(jìn)一步研究以提高該技術(shù)的性能， 以克服實(shí)際應(yīng)用中的挑戰(zhàn)[45]。

　　四、 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)

　　聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) (Polymerase chain reactions，PCR) 技術(shù)是一種可對(duì)特定基因片段進(jìn)行放大擴(kuò)增的分子生物學(xué)技術(shù)， 具有靈敏度高、 特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。

　　近 年 來(lái) ， 隨著多學(xué)科交叉研究的發(fā)展 ， 以PCR 技術(shù)及其衍生技術(shù)為代表的分子生物學(xué)技術(shù)，逐漸被應(yīng)用于農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全快速檢測(cè)領(lǐng)域， 特別是用于品種溯源、 真?zhèn)舞b別、 轉(zhuǎn)基因檢測(cè)、 病原微生物測(cè)定等方面[46～51]。常 用 的 PCR 技術(shù)主要包括直接 PCR、 多 重PCR (Multiplex PCR)、 重組酶聚合酶擴(kuò)增 (Recombinasepolymerase amplification， RPA) 、 實(shí) 時(shí)熒 光 定 量 PCR (R eal-time fluorogenic quantitativePCR， RT-PCR)、 環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增 (Loop-mediatedisothermal amplification， LAMP) 等[52～55]。 其中，應(yīng)用最為廣泛的為 RT-PCR。

　　相較于傳統(tǒng)的直接PCR， RT-PCR 不需要進(jìn)行凝膠電泳等后續(xù)分析過(guò)程， 而是依靠熒光信號(hào)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)擴(kuò)增子拷貝數(shù)的增加， 從而達(dá)到實(shí)時(shí)檢測(cè)的目的[54]。 TAN 等[46]建立了一種 SYBR Green 定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)方法， 用于肉制品中豬肉摻假的快速檢測(cè)。 該方法以家豬基因組中特異性的重復(fù) LINE-1 基因?yàn)槟繕?biāo)片段， 同時(shí)改進(jìn)了基因組 DNA 的提取效率， 并驗(yàn)證了方法的特異性、 靈敏度 (0.001% w/w) 和穩(wěn)健性。

　　WAN等[48]利用綠色飽和熒光染料構(gòu)建了兩種快速檢測(cè)沙門(mén)氏菌的 RT-PCR 體系， 并采用石墨烯量子點(diǎn)作為放大系統(tǒng)， 以增強(qiáng)方法的特異性。 通過(guò)實(shí)際樣品驗(yàn)證， 該方法陽(yáng)性檢出率更高， 所需時(shí)間更短， 適用于即食水果和蔬菜中沙門(mén)氏菌的檢測(cè)。 LI 等[51]開(kāi)發(fā)了一種針對(duì) IE034 轉(zhuǎn)基因玉米的 RT-PCR 定量檢測(cè)方法， 根據(jù)插入序列與玉米側(cè)翼基因組序列的5' 端連接， 設(shè)計(jì)了 134 bp 的擴(kuò)增子。 通過(guò)實(shí)際樣本 檢 測(cè) 驗(yàn) 證 ， 該方法適用于植物源性農(nóng)產(chǎn)品中IE034 轉(zhuǎn)基因成分的特征識(shí)別、 風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估及有效監(jiān)測(cè)。

　　我國(guó)也已出臺(tái)多項(xiàng)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)及行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)， 對(duì)于RT-PCR 方法的特異性、 準(zhǔn)確性予以肯定[56～58]。盡管 PCR 技術(shù)在農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全快速檢測(cè)領(lǐng)域發(fā)展較為迅速， 但由于方法本身存在的局限性(如易出現(xiàn)假陽(yáng)性、 儀器成本較高等)， 在實(shí)際應(yīng)用中仍存在較多需要解決的問(wèn)題。 隨著儀器和材料技術(shù)的不斷改進(jìn)， 將 PCR 技術(shù)與新型材料 (如量子點(diǎn)、 納米顆粒等) 相結(jié)合以進(jìn)一步提高檢測(cè)的靈敏度、 降低檢測(cè)成本， 可作為未來(lái)發(fā)展的方向。

　　五、 展望

　　基于不同生物技術(shù)開(kāi)發(fā)的農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全快速檢測(cè)方法種類(lèi)較多， 且優(yōu)缺點(diǎn)各異。 應(yīng)用于實(shí)際檢測(cè)工作時(shí)， 可根據(jù)不同的檢測(cè)樣品及檢測(cè)需求選擇合適的方法及相關(guān)產(chǎn)品。隨著快速檢測(cè)在食品安全監(jiān)管系統(tǒng)中所占比重逐漸增大， 對(duì)于快速檢測(cè)技術(shù)及相關(guān)儀器、 產(chǎn)品的要求也逐漸提高。 然而， 目前的快速檢測(cè)方法多為定性或半定量分析， 如何在準(zhǔn)確定量分析方面有所突破， 將是科研人員未來(lái)的研究重點(diǎn)。

　　此外， 目前市售的快速檢測(cè)產(chǎn)品， 尚無(wú)統(tǒng)一的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。 國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局于 2021 年 4 月發(fā)布了 “關(guān)于公開(kāi)征求 《關(guān)于規(guī)范食品快速檢測(cè)使用的意見(jiàn) (征求意見(jiàn)稿)》 意見(jiàn)的公告”， 以期規(guī)范食品快速檢測(cè)的使用。 劉海虹等[59]在借鑒國(guó)內(nèi)外相關(guān)的檢測(cè)方法和產(chǎn)品評(píng)價(jià)技術(shù)的基礎(chǔ)上， 研究制定了食品快速檢測(cè)產(chǎn)品評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范， 并在廣東省進(jìn)行了應(yīng)用驗(yàn)證，為建立符合我國(guó)實(shí)際情況的食品快速檢測(cè)產(chǎn)品評(píng)價(jià)體系積累了經(jīng)驗(yàn); 羅俊霞等[60]分別以 “ELISA 快速檢測(cè)”“膠體金 ICA 快速檢測(cè)”和“酶抑制-比色法快速檢測(cè)” 3 類(lèi)試劑盒為例， 根據(jù)其各自的特征和檢測(cè)目的， 初步探索和研究了不同的快速檢測(cè)試劑盒評(píng)價(jià)方法， 對(duì)我國(guó)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)試劑盒的評(píng)價(jià)工作起到了一定的參考作用。綜上所述， 無(wú)論是更加準(zhǔn)確、 靈敏的快速檢測(cè)技術(shù)方法的研發(fā)， 還是快速檢測(cè)產(chǎn)品評(píng)價(jià)體系的建立， 都將是今后農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全快速檢測(cè)領(lǐng)域發(fā)展的方向。

　　參考文獻(xiàn)

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　　作者：侯 薔 郝立武 張書(shū)宏 周 鑫 張 誼 鄭百芹

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