本文摘要：櫻桃具有豐富的營養(yǎng)價(jià)值，櫻桃成熟時(shí)顏色鮮紅，玲瓏剔透，營養(yǎng)豐富，主治體虛氣弱，氣短心悸，咽干口渴，及風(fēng)濕腰腿疼痛等癥狀，下面小編介紹一篇關(guān)于櫻桃品種的一篇論文。 摘 要：本試驗(yàn)采用ISSR技術(shù)對12份櫻桃種質(zhì)資源的遺傳多樣性進(jìn)行了研究。篩選出6條IS
櫻桃具有豐富的營養(yǎng)價(jià)值，櫻桃成熟時(shí)顏色鮮紅，玲瓏剔透，營養(yǎng)豐富，主治體虛氣弱，氣短心悸，咽干口渴，及風(fēng)濕腰腿疼痛等癥狀，下面小編介紹一篇關(guān)于櫻桃品種的一篇論文。
摘 要：本試驗(yàn)采用ISSR技術(shù)對12份櫻桃種質(zhì)資源的遺傳多樣性進(jìn)行了研究。篩選出6條ISSR引物對供試材料進(jìn)行擴(kuò)增，共檢測到48個(gè)遺傳位點(diǎn)，包含44個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)，多態(tài)性位點(diǎn)百分率為91.67%。材料間遺傳相似系數(shù)為0.29～0.98，平均為0.65。當(dāng)閾值為0.58時(shí)，供試樣品可分為3個(gè)組，即組Ⅰ、組Ⅱ和組Ⅲ。遺傳相似性分析結(jié)果顯示材料間具有豐富的遺傳多樣性。
關(guān)鍵詞：櫻桃;遺傳多樣性;ISSR
中圖分類號：S662.501 文獻(xiàn)標(biāo)識號：A 文章編號：1001-4942(2014)11-0012-03
櫻桃為薔薇科(Rosacea)李屬(Prunus)櫻桃組植物，多分布在亞洲和歐洲[1]，全世界櫻桃組植物約有120種以上，主要分布于北半球溫和地帶。中國栽培櫻桃已有3000多年的歷史。我國栽培的櫻桃可分為四大類，即中國櫻桃、甜櫻桃、酸櫻桃和毛櫻桃[2]，其中以中國櫻桃和甜櫻桃為主要栽培對象。我國櫻桃種質(zhì)資源豐富，華北、華中及兩廣地區(qū)皆有分布，尤以浙江、山東、河南、江蘇、陜西、四川、安徽、河北分布最多，為充分挖掘櫻桃種質(zhì)資源提供了天然條件[3，4]。
ISSR(Inter-simple sequence repeat) 是Zietkiewitcz等于1994年發(fā)展起來的微衛(wèi)星基礎(chǔ)上的分子標(biāo)記[5]，是一種簡單重復(fù)序列之間擴(kuò)增多態(tài)性分子標(biāo)記。其利用基因組中有關(guān)SSR序列信息，引物的開發(fā)較SSR引物簡單，且可以在不同的物種間通用，不像SSR標(biāo)記一樣具有較強(qiáng)的種屬特異性。ISSR分子標(biāo)記不僅具有SSR標(biāo)記的穩(wěn)定性且揭示的多態(tài)性較RAPD高[6，7]，是一種非常理想的分子標(biāo)記技術(shù)，目前已廣泛用于植物品種鑒定、遺傳作圖、遺傳多樣性及分子生態(tài)學(xué)研究。本試驗(yàn)采用ISSR標(biāo)記技術(shù)對山東省部分主栽櫻桃品種和砧木資源進(jìn)行檢測，并分析其遺傳背景差異，對櫻桃資源的科研、生產(chǎn)具有重要的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值和科學(xué)價(jià)值。
1 材料與方法
1.1 試驗(yàn)材料
試驗(yàn)所用材料均于2014年4月采自山東省果樹研究所櫻桃品種資源保存圃，所用12份材料均為目前生產(chǎn)上的主要栽培品種。隨機(jī)采取健康嫩葉迅速于液氮中冷凍，放于-80℃冰箱保存?zhèn)溆�。樣品編號及品種見表1。
1.2 模板DNA的制備
采用改良CTAB法[8]提取葉片的基因組DNA，用0.8%的瓊脂糖凝膠電泳檢測其質(zhì)量。稀釋DNA至終濃度10 ng/μL，-20℃儲存?zhèn)溆谩?/p>
1.3 ISSR反應(yīng)
ISSR引物委托上海生工生物工程股份有限公司合成，篩選出6條用于PCR(表2)。核心期刊PCR擴(kuò)增體系為20 μL，其中10 × buffer (含Mg2+) 2 μL，2.5 mmol/L dNTPs 1.6 μL，10 μmol/L Primer 1 μL，2.5 U/μL Taq聚合酶0.4 μL，10 ng/μL DNA模板1 μL 和無菌ddH2O 14 μL。PCR 反應(yīng)程序?yàn)?5℃ 5 min;95℃ 1 min，48℃ 1 min，72℃ 1 min，35 個(gè)循環(huán);72℃ 10 min，程序結(jié)束后進(jìn)入4℃保存。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物用1.5%瓊脂糖凝膠電泳分離檢測，于紫外燈下觀察，并拍照保存。
1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
將所獲得的電泳譜帶進(jìn)行數(shù)字化統(tǒng)計(jì)，按照圖譜中同一位置條帶的“有”、“無”進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，有帶標(biāo)記為“1”，無帶標(biāo)記為“0”，僅記錄重復(fù)性好、條帶清晰且片段為200～750 bp 范圍內(nèi)的擴(kuò)增帶。將DNA擴(kuò)增帶數(shù)據(jù)輸入到數(shù)據(jù)矩陣，通過NTSYSpc(version 2.11 a)采用非加權(quán)類平均法(UPGMA)進(jìn)行聚類分析建立聚類圖，并計(jì)算遺傳相似系數(shù)。
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