論文發(fā)表鉤齒溲疏的SRAP遺傳多樣性

　　摘 要：運(yùn)用SRAP分子標(biāo)記研究了山東省3個(gè)鉤齒溲疏居群的遺傳多樣性，結(jié)果顯示，用15對(duì)引物共檢測(cè)到244個(gè)位點(diǎn)，其中多態(tài)位點(diǎn)167個(gè)，物種水平多態(tài)位點(diǎn)百分率(PPL) 68.44%，Nei’s基因多樣性指數(shù)(H) 0.2158，Shannon’s信息指數(shù)(I)0.3282，數(shù)據(jù)表明鉤齒溲疏有較高的遺傳多樣性水平;居群間遺傳分化系數(shù)(Gst)為0.3685，表明居群間遺傳變異只占36.85%，遠(yuǎn)低于居群內(nèi)遺傳分化;在居群水平上，以嶗山鉤齒溲疏居群的遺傳多樣性最高，徂徠山最低;居群間遺傳一致度(GI)和遺傳距離(GD)變化范圍分別為0.8350～0.8884和0.1184～0.1803，居群間的遺傳距離與地理位置間沒(méi)有直接相關(guān)性。

　　關(guān)鍵詞：鉤齒溲疏;SRAP;遺傳多樣性

　　鉤齒溲疏(Deutzia baroniana)屬于虎耳草科(Saxifragaceae)溲疏屬(Deutzia)，落葉灌木，分布于遼寧、河北、山西、陜西、山東、江蘇和河南[1]。鉤齒溲疏花朵潔白，繁密而素凈，花期長(zhǎng)，且盛開(kāi)于初夏，正值少花時(shí)節(jié)，宜叢植于山坡、草坪、路旁或林緣，也是巖石園、花籬的常用材料，花枝可作插花觀賞。鉤齒溲疏適應(yīng)性非常強(qiáng)，常生于溝谷、林緣或巖石縫中，耐旱、耐瘠薄、抗寒，對(duì)于干旱、少雨的北方城市綠化極為適宜，是北方十分難得的園林綠化、美化材料。此外，鉤齒溲疏根、葉、果還可藥用。因此，鉤齒溲疏具有很高的觀賞和經(jīng)濟(jì)價(jià)值，是一種值得開(kāi)發(fā)的野生植物資源，值得大力引種并繁育推廣。

　　一個(gè)物種之所以能繁殖存活，并且適應(yīng)環(huán)境改變，根本原因在于其遺傳多樣性[2]。北大核心期刊居群對(duì)環(huán)境的適應(yīng)能力在一定程度上由居群的遺傳多樣性水平制約著，因此通過(guò)研究其遺傳多樣性水平可預(yù)測(cè)這個(gè)居群未來(lái)的發(fā)展趨勢(shì)[3]。而目前尚未見(jiàn)從DNA水平上對(duì)鉤齒溲疏的遺傳多樣性進(jìn)行分析的研究和報(bào)道。

　　相關(guān)序列擴(kuò)增多態(tài)性(Sequence-related amplified polymorphism，SRAP)是通過(guò)設(shè)計(jì)獨(dú)特的引物對(duì)基因ORFs(Open reading frames)的特定區(qū)域進(jìn)行擴(kuò)增并分析的標(biāo)記手段[4]。目前已成功應(yīng)用于作物遺傳多樣性評(píng)價(jià)、指紋圖譜構(gòu)建、重要性狀的標(biāo)記以及相關(guān)基因的克隆等方面[5～8]。本研究對(duì)山東省內(nèi)21份鉤齒溲疏進(jìn)行SRAP遺傳多樣性分析，旨在研究其遺傳多樣性水平，為開(kāi)發(fā)利用鉤齒溲疏野生資源、在景觀應(yīng)用中選育優(yōu)良品種提供分子水平的依據(jù)。

　　1 材料與方法

　　1.1 試驗(yàn)材料

　　試驗(yàn)樣品于2012～2013年采自山東嶗山、泰山和徂徠山，共21份樣品(表1)。同一居群相鄰植株采樣間距30 m以上，采取新鮮幼嫩葉片放入密封袋中，用變色硅膠干燥。記錄所采樣品的小地名、海拔、經(jīng)緯度并編號(hào)。

　　1.2 DNA提取

　　選用改良的CTAB法[9]提取樣品總DNA，用0.8%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)DNA質(zhì)量，用紫外分光光度計(jì)檢測(cè)DNA濃度后用ddH2O稀釋至50 ng/μL，-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

　　1.3 SRAP-PCR反應(yīng)體系和程序

　　SRAP引物設(shè)計(jì)參照Li等[4]，13個(gè)正向引物和19個(gè)反向引物共組成247對(duì)引物組合，由上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司合成。從中篩選出15對(duì)擴(kuò)增條帶數(shù)量多、清晰、穩(wěn)定的引物組合(表2)用于正式擴(kuò)增。

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