中國省級醫(yī)學(xué)期刊淺析乙肝病毒PreS1抗原

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　　【摘要】目的 探討乙型肝炎病毒(HBV)前S1抗原(Pre-S1)與乙肝病毒DNA(HBV-DNA)和乙型肝炎e抗原(HBeAg)之間的相關(guān)性，為乙型肝炎的診斷、療效評估提供科學(xué)依據(jù)。方法 1120例臨床標(biāo)本分別采用定量PCR技術(shù)檢測HBV-DNA載量;采用酶聯(lián)免疫法(ELISA)法檢測HBeAg;采用酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測前S1抗原。結(jié)果 569例HBV-DNA PCR陽性標(biāo)本中，前S1抗原陽性448例，HBeAg陽性252例，兩種檢測結(jié)果間存在顯著差異(P<0.05)。結(jié)論 血清前S1抗原、HBeAg與HBV復(fù)制密切相關(guān)。作為反映HBV復(fù)制的指標(biāo)，前S1抗原優(yōu)于HBeAg，前S1抗原在乙肝流行病學(xué)調(diào)查上和臨床診斷及療效觀察方面有重要的臨床價值。

　　【關(guān)鍵詞】前S1抗原 乙型肝炎e抗原 乙型肝炎病毒

　　乙型肝炎病毒(HBV)感染是一個全球關(guān)注的健康問題，也是世界范圍內(nèi)導(dǎo)致慢性肝臟疾病最常見的原因。我國為高發(fā)區(qū)，約有10%的人口為HBV攜帶者。研究發(fā)現(xiàn)，HBV前S1抗原(PreS1-Ag)的檢測對乙型肝炎的早期診斷、病情和藥物療效及預(yù)后判斷具有十分重要意義，PreS1-Ag是繼“乙型肝炎兩對半”后，檢驗(yàn)HBV感染的新標(biāo)志物。乙肝肝炎病毒前S1抗原、前S2抗原和HBeAg三者共同構(gòu)成乙肝肝炎病毒(HBV)外殼大蛋白[1-2]。HBV-DNA PCR 檢測作為乙肝病毒復(fù)制的金標(biāo)準(zhǔn),由于受到實(shí)驗(yàn)本身對實(shí)驗(yàn)條件要求較高等因素制約，通常臨床多以檢測乙肝血清標(biāo)志物中的HBeAg作為反映病毒復(fù)制情況的依據(jù)。但目前較多的證據(jù)顯示HBeAg 作為反映乙肝病毒復(fù)制情況的標(biāo)志物并不敏感[3-4]。本文對1120例臨床慢性乙肝病人血清進(jìn)行了HBV-DNA PCR測定及前S1抗原和HBeAg檢測，比較了后兩者對于反映病毒復(fù)制情況的敏感性。

　　1 方法與材料

　　1.1 標(biāo)本來源 2008年5月～2010年5月間收集本院慢性乙肝病人血清1120例。其中男性802例，女性317例，年齡在18～65歲之間。排除患有其他類型肝炎或肝臟其它疾病。血液于采集2h內(nèi)經(jīng)1500r/min離心，于當(dāng)日完成全部試驗(yàn)。

　　1.2 方法

　　1.2.1 前S1抗原采用酶聯(lián)免疫雙抗體夾心ELISA法，使用上海阿爾法醫(yī)藥有限公司生產(chǎn)的試劑盒。嚴(yán)格按試劑說明書操作。

　　1.2.2 HBeAg采用酶聯(lián)免疫法測定，使用上海實(shí)業(yè)科華生物技術(shù)有限公司試劑。嚴(yán)格按試劑說明書操作。

　　1.2.3 HBV-DNA采用定量PCR，使用中山大學(xué)達(dá)安基因股份公司DA7600實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增儀，試劑為中山大學(xué)達(dá)安基因股份公司生產(chǎn)的HBV-DNA PCR試劑盒，嚴(yán)格按試劑說明書操作。

　　1.3 統(tǒng)計(jì)方法 所有數(shù)據(jù)分析采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件包處理，計(jì)數(shù)資料的比較采用x2檢驗(yàn)。

　　2 結(jié)果

　　2.1 Pre-S1抗原、HBeAg與HBV DNA關(guān)系： 1120例標(biāo)本中有569例HBV-DNA PCR陽性;以HBV DNA陽性為標(biāo)準(zhǔn)，HBeAg、 Pre-S1抗原 的檢出率分別為43.9%(250/569)、77.8%(443/569);與HBV-DNA的總符合率分別為71.7%(803/1120)、86.7%(971/1120),說明在判斷HBV復(fù)制有無及活躍程度方面，檢測Pre-S1抗原比HBeAg更有意義。經(jīng)配對計(jì)數(shù)X2檢驗(yàn)，HBV DNA與HBeAg檢出率差異有顯著性;HBV DNA與Pre-S1抗原檢出率差異無顯著性(見表1)，說明HBeAg陰性并不能除外HBV復(fù)制。HBeAg檢出率與Pre-S1檢出率比差異有顯著性(X2=15.26，P<0.05)。

　　表1 Pre-S1抗原、HBeAg與HBV DNA關(guān)系 HBV DNA與 Pre-S1比，X2=1.02,P>0.05; HBV DNA與HBeAg比，X2=21.54,P<0.05。

　　3 討論

　　HBV雙鏈DNA含有四個編碼蛋白的基因組，分別是S基因、C基因、P基因、X基因。S基因可分為前S1基因、前S2基因和S基因。由S基因組編碼可得到三類乙肝病毒外膜蛋白：226個氨基酸組成的肽段，即S基因;281個氨基酸組成的肽段，含S蛋白和前S2蛋白;389個氨基酸組成的肽段，含S蛋白、前S2蛋白和前S1蛋白。乙肝病人血清中含有三種顆粒，即：完整的病毒顆粒Dane顆粒、小球型顆粒和管型顆粒。其中只有Dane顆粒含有病毒DNA，能進(jìn)行復(fù)制，具有傳染性。前S1蛋白主要存在Dane顆粒上[5]。正常人肝細(xì)胞膜上存在HBV前S1抗原受體,能直接吸附HBV，這種受體與HBV的結(jié)合點(diǎn)定位于前S1R 21～47氨基酸序列上[6]。

　　核酸擴(kuò)增熒光定量檢測法可敏感檢測出HBV DNA的含量，通常將HBV DNA定量>103拷貝/ml判斷為HBV DNA陽性。以HBV DNA陽性為標(biāo)準(zhǔn)，Pre-S1抗原的檢出率、與HBV DNA的總符合率均較HBeAg陽性者高，說明判斷HBV有無復(fù)制及復(fù)制活躍程度方面，檢測Pre-S1抗原比HBeAg更有意義[7-8]。

　　綜上所述,HBV-M,HBV-DNA和前S1抗原之間的檢測結(jié)果有相互關(guān)聯(lián),但所表達(dá)的臨床意義并不完全一致,對不同類型HBV感染患者前S1抗原,HBV-DNA和HBV-M聯(lián)合動態(tài)檢測有助于臨床診斷、療效觀察及預(yù)后判斷。HBV-DNA和HBeAg是反映HBV感染復(fù)制的重要標(biāo)志, PreS1抗原不僅是反映病毒復(fù)制的標(biāo)志,而且比HBeAg敏感性更高,有很好的獨(dú)立參考價值。PreS1抗原在乙肝的臨床診斷及療效觀察等方面中起到重要作用,對HBV-M,HBV-DNA的檢測有重要的補(bǔ)充作用。同時還可以作為輸血前常規(guī)檢查,可以很大程度減少輸血后肝炎的發(fā)生。

　　參考文獻(xiàn)

　　[1] 侯曉菁，梁艷，何鳳春，等.乙型肝炎病毒前抗原與e抗原、乙型肝炎病毒DNA的相關(guān)性分析[J].第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，28(12)：1306-1308.

　　[2] 李步榮，李麗華，李妙羨.乙肝病毒PreS1抗原的臨床應(yīng)用[J].第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，28(5)：442-444..

　　[3] 李魯平,張曉月,張?jiān)?慢性乙型肝炎乙病毒大蛋白檢測分析[J].中國公共衛(wèi)生,2007,23(12):221-222.

　　[4] 吳正林,劉玢,肖桂初,等.乙型肝炎病毒表面大蛋白與HBV DNA檢測的對比研究[J].中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué),2007,4:479-481.

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