本文摘要：摘要 為探究凡納濱對蝦(Litopenaeus vannamei)工廠化循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)的養(yǎng)殖水體水質(zhì)情況以及微生物菌群的組成結(jié)構(gòu)，本研究利用高通量測序技術(shù)和生物信息學(xué)分析手段，測定凡納濱對蝦工廠化循環(huán)水養(yǎng)殖過程一級移動床生物凈化、二級固定床生物凈化、養(yǎng)殖水體的水質(zhì)指標(biāo)、水
摘要 為探究凡納濱對蝦(Litopenaeus vannamei)工廠化循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)的養(yǎng)殖水體水質(zhì)情況以及微生物菌群的組成結(jié)構(gòu)，本研究利用高通量測序技術(shù)和生物信息學(xué)分析手段，測定凡納濱對蝦工廠化循環(huán)水養(yǎng)殖過程一級移動床生物凈化、二級固定床生物凈化、養(yǎng)殖水體的水質(zhì)指標(biāo)、水體和生物凈化載體以及對蝦腸道微生物菌群的組成。結(jié)果顯示，水體的氨氮(NH4+-N)和亞硝酸鹽氮(NO2–-N)質(zhì)量濃度顯著降低，分別為 0.85 和 0.21 mg/L。養(yǎng)殖系統(tǒng)水體、生物凈化載體和蝦腸道樣品中共有的優(yōu)勢菌為變形菌門(Proteobacteria)、擬桿菌門(Bacteroidetes)，此外，一級、二級生物凈化系統(tǒng)水體中的放線菌門(Actinobacteria)為優(yōu)勢菌，生物凈化載體中浮霉菌門(Planctomycetes)和硝化螺旋菌門(Nitrospirae)為優(yōu)勢菌;對蝦腸道中的厚壁菌門(Firmicutes)為優(yōu)勢菌。另外，對蝦養(yǎng)殖循環(huán)水系統(tǒng)中生物凈化載體上的細(xì)菌物種含量比水樣中的細(xì)菌物種少，但微生物多樣性高于養(yǎng)殖水體，生物凈化載體中微生物具有低豐度和高多樣性的特點(diǎn)。綜上所述，生物凈化系統(tǒng)可有效地增加水體中促進(jìn)氮、磷代謝的微生物菌群，調(diào)控養(yǎng)殖水體的水質(zhì)指標(biāo)，研究結(jié)果為凡納濱對蝦工廠化循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)構(gòu)建及水質(zhì)調(diào)控提供理論依據(jù)。
關(guān)鍵詞 凡納濱對蝦;工廠化循環(huán)水養(yǎng)殖;生物凈化;水質(zhì)指標(biāo);微生物菌群
凡納濱對蝦(Litopenaeus vannamei)是我國最重要的對蝦養(yǎng)殖品種，2020 年凡納濱對蝦海水養(yǎng)殖產(chǎn)量達(dá) 119.7 萬 t，占全國蝦類海水養(yǎng)殖總產(chǎn)量的 80.5%(農(nóng)業(yè)農(nóng)村部漁業(yè)漁政管理局等, 2021)。凡納濱對蝦養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的發(fā)展經(jīng)歷了池塘養(yǎng)殖、溫棚養(yǎng)殖、高位池養(yǎng)殖、工廠化養(yǎng)殖等養(yǎng)殖模式(朱林等, 2019)。
隨著凡納濱對蝦集約化養(yǎng)殖技術(shù)的不斷發(fā)展，放養(yǎng)密度和飼料投喂量的增加，養(yǎng)殖動物的產(chǎn)量和養(yǎng)殖水域的利用率明顯提高(陳明康等, 2020)，但是大量殘餌、糞便、肥料和藥物的投入使養(yǎng)殖水環(huán)境日益惡化，負(fù)面環(huán)境效應(yīng)非常突出，導(dǎo)致對蝦疫病肆虐橫行、環(huán)境污染嚴(yán)重(祁真等, 2004)。因此，發(fā)展無公害生態(tài)養(yǎng)殖，推動工廠化循環(huán)水養(yǎng)殖，高效可持續(xù)的生物凈化系統(tǒng)研究已成為當(dāng)今凡納濱對蝦集約化養(yǎng)殖研究的熱點(diǎn)之一。
循環(huán)水養(yǎng)殖模式是將養(yǎng)殖水經(jīng)物理、化學(xué)及生物凈化處理后重復(fù)使用的新型養(yǎng)殖方式(王峰等, 2013)，在水資源節(jié)約、養(yǎng)殖廢棄物處理、對蝦疾病控制以及減少生態(tài)污染等方面具有明顯的優(yōu)勢(張龍等, 2019;張健龍等, 2017)。生物凈化是循環(huán)水水處理的核心環(huán)節(jié)，濾料是生物凈化設(shè)施的重要組成部分，不同濾料因?yàn)椴馁|(zhì)、比表面積、耐沖刷能力、水力特性等差異造成其表面生物群落的不一致，從而影響對養(yǎng)殖水的處理效果(蔡云龍等, 2005)。
而養(yǎng)循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)中的有益微生物菌群在凈化水質(zhì)、降低氨氮(NH4+-N)和亞硝態(tài)氮(NO2–-N)(邵青等, 2001; Fan et al, 2018)、營養(yǎng)循 環(huán)(Cornejo-Granados et al, 2018)、病原 防控(Rungrassamee et al, 2016)及養(yǎng)殖物種健康(樊英等,2017)等方面也發(fā)揮著重要的作用。目前的研究主要集中在生物凈化濾料的單因素對水質(zhì)的效應(yīng)研究，其對環(huán)境及養(yǎng)殖對蝦微生物菌群的研究較少。因此，本研究通過分析對蝦工廠化循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)中水質(zhì)指標(biāo)、水體及對蝦腸道微生物菌群結(jié)構(gòu)的變化，探討工廠化循環(huán)水系統(tǒng)生物凈化對水體養(yǎng)殖對蝦的影響效果，為對蝦工廠化循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)和養(yǎng)殖模式的構(gòu)建提供基礎(chǔ)參數(shù)。
1 材料與方法
1.1 養(yǎng)殖系統(tǒng)的組成與構(gòu)建
實(shí)驗(yàn)在海陽市黃海水產(chǎn)有限公司養(yǎng)殖基地進(jìn)行，對蝦工廠化循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)由原石斑魚(Epinephelinae)養(yǎng)殖車間進(jìn)行升級改造，總面積為 800m2，有效養(yǎng)殖水體為 600 m3。8 個規(guī)格相同的水泥養(yǎng)殖池(長 9 m、寬 9 m、深 2 m, 養(yǎng)殖水體 600 m3)通過回水管道和進(jìn)水管道與水處理系統(tǒng)相連構(gòu)成封閉循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)。水處理系統(tǒng)是由中國水產(chǎn)科學(xué)研究院海水陸基工廠化養(yǎng)殖創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)自主設(shè)計(jì)構(gòu)建。
主要由2 個養(yǎng)殖池改建而成，一個養(yǎng)殖池分隔成泵池、微濾機(jī)池、一級移動床生物凈化池和綜合調(diào)節(jié)池 4 部分，一級移動床生物凈化池生物濾料為多孔 PE 填料(比表面積約 600 m2/m3);另一個養(yǎng)殖池分隔成二級固定床生物凈化池、紫外消毒池和集中增氧池 3 部分，二級固定床生物凈化池生物濾料為立體彈性填料(比表面積約 150 m2/m3)。整個養(yǎng)殖系統(tǒng)配備 2 臺 3.0kW、氣壓為 39.2 kPa 的羅茨鼓風(fēng)機(jī)，滿足對蝦工廠化養(yǎng)殖 6.0 mg/L 以上的溶氧和生物凈化所需的溶氧與曝氣要求，養(yǎng)殖系統(tǒng)工藝流程。養(yǎng)殖用水為天然海水，經(jīng)沉淀、砂濾、調(diào)溫、增氧處理后使用。
1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)
凡納濱對蝦苗種由海南正泰一號水產(chǎn)種苗有限公司培育，實(shí)驗(yàn)于 2020 年 10 月 16 日開始，初始放養(yǎng)密度為 500 尾/m3，蝦苗平均體質(zhì)量為(0.6±0.1)g。各組養(yǎng)殖水循環(huán)量為 6 h 循環(huán) 1 次，每天 4 個循環(huán)，每天補(bǔ)充水量為水體的 3%左右。根據(jù)對蝦的生長情況，投喂不同顆粒大小的青島正大農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司生產(chǎn)的凡納濱對蝦配合飼料(粗蛋白≥42%、粗脂肪≥4%、粗纖維≥3%)。
養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)初期 22 d，投喂粒徑為 0.5 mm 的配合飼料，22 d 后，投喂粒徑為 1 mm的配合飼料，4 次/d，投喂時間分別為 07:00、12:00、17:00 和 22:00，日投喂量為對蝦體重的 10%，養(yǎng)殖后期投飼率降至 4%。在養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)的第 80 天，采集一級移動凈化池水體(FMW)、二級固定床生物凈化池水體(SIW)、養(yǎng)殖池水體(PC)以及多孔 PE 填料(FMB)、立體彈性填料(SIB)和對蝦腸道樣品。
在上午投喂 4 h 后，從每個處理池分選擇池中心以及周邊兩點(diǎn)采集水面以下 50 cm處的水樣 500 mL，用 0.22 µm 聚碳酸酯過濾器過濾，濾膜放入無菌離心管–20℃冷凍保存用于分析微生物菌群結(jié)構(gòu)，過濾后的水用于測水質(zhì)指標(biāo);取一級移動床生物凈化池多孔 PE 填料 5 片，取二級固定床生物凈化池立體彈性填料 10 cm，分別用 500 mL 純凈水進(jìn)行振蕩、抽濾，濾膜放入無菌離心管–20℃冷凍保存用于分析微生物菌群結(jié)構(gòu)。隨機(jī)從 8 個養(yǎng)殖池中挑選 18 尾對蝦，分別采集腸道(LVT)樣品，混合成 3 個樣品放入無菌離心管，–20℃冷凍保存，用于分析微生物菌群結(jié)構(gòu)。
1.3 測定與計(jì)算方法
1.3.1 水質(zhì)指標(biāo) 水體的水溫、溶氧、pH 和鹽度利用水質(zhì)檢測儀(YSI556, 美國)測定;總氮(TN)、硝態(tài)氮(NO3–-N)、亞硝態(tài)氮(NO2–-N)和氨氮(NH4+-N)的濃度利用營養(yǎng)鹽流動分析儀(Skalar, 荷蘭)測定。
1.3.2 微生物菌群檢測 水體和對蝦實(shí)驗(yàn)樣品中的微生物總 DNA 的提取采用 TAB/SDS 法進(jìn)行，利用1%瓊脂糖凝膠電泳檢測樣品的基因組 DNA，檢測出清晰的 DNA 條帶，然后用 NanoDrop 2000c 微量核酸檢測儀 NC20 檢測其 DNA 純度，其 OD260 nm/OD280 nm=1.9~2.0，符合 Ilumina MiSep 測序要求。使用 16S rDNA基因 V4 區(qū)帶有 barcode 的特異引物對 DNA 進(jìn)行 PCR擴(kuò)增，引物為 515F (5’-GTGCCAGCMGCCGCGG-3’)和 806R (5’-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3’)。PCR擴(kuò)增在 ABI GeneAmp® 9700 型 PCR 儀中進(jìn)行。PCR反應(yīng)體系為 30 μL，包括 DNA 模板 10 ng、15 μL ofPhusion® High-Fidelity PCR Master Mix、0.2 μmol/L正反向引物。
PCR 反應(yīng)程序?yàn)?98℃ 1 min;98℃10 s，50℃ 30 s，72℃ 60 s，30 個循環(huán);72℃ 5 min。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng) 2%瓊脂糖凝膠電泳檢測，等比例混合后，利用 GeneJET Gel Extraction Kit (Thermo Scientific)純化回收目的片段。使用 NEB Next® Ultra™ DNALibrary Prep Kit for Illumina (NEB, 美國)進(jìn)行測序文庫構(gòu)建。測序文庫經(jīng) Qubit@ 2.0 Fluorometer (ThermoScientific)和 Agilent Bioanalyzer 2100 system 檢測合格后，在 Illumina MiSeq 平臺進(jìn)行測序。
1.3.3 生物信息學(xué)分析
利用 FLASH 軟件對基于barcode 所得樣品的有效序列進(jìn)行質(zhì)控過濾。使用UPARSE 軟件進(jìn)行序列分析，并以≥97%的相似度定義操作分類單位(OTUs)。使用 UCHIME 軟件確定嵌合序列。利用 Mothur 軟件使用 97%相似度的 OTUs，利用 R 語言工具繪制所有微生物樣本稀釋曲線。使用Mothur 軟件根據(jù) Chao1、辛普森(Simpson)和香濃(Shannon)指數(shù)計(jì)算菌群 α-多樣性。使用 R 語言工具分析和繪制維恩(Venn)圖，用于分析各組微生物樣本共有和獨(dú)有的 OTUs 數(shù)量。使用 R 軟件包基于加權(quán)和非加權(quán) unifrac 距離的主坐標(biāo)進(jìn)行降維分析(PCoA)評估菌群 β-多樣性。
利用 R 語言工具在門和屬水平上分別統(tǒng)計(jì)細(xì)菌群落相對豐度。利用 Metastats 軟件分析各組細(xì)菌分類學(xué)的豐度差異。采用 LEfSe 軟件，使用線性判別分析(LDA)效應(yīng)大小(LEfSe)分析，對不同組內(nèi)的生物標(biāo)志物進(jìn)行定量分析。根據(jù)各個 OTU 的豐度概況，使用 Cytoscape 軟件構(gòu)建菌群生態(tài)網(wǎng)絡(luò)。使用 RandomForest 軟件包進(jìn)行 RandomForest 分析。生物信息學(xué)分析由明科生物技術(shù)(杭州)有限公司提供技術(shù)支持。
1.3.4 數(shù)據(jù)分析
所得數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤(Mean±SE)表示，采用 SPSS 25.0 軟件進(jìn)行方差分析(ANOVA)和多重比較(LSD 法和 Duncan 法)，P<0.05表示差異顯著。
2 結(jié)果
2.1 生物凈化系統(tǒng)對養(yǎng)殖水體水質(zhì)的影響
生物凈化對循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)水體無機(jī)營養(yǎng)鹽和有機(jī)質(zhì)含量質(zhì)量濃度的影響。凈化池和養(yǎng)殖池的水溫保持在 28.5℃左右，鹽度為 31 左右，pH 為7.8~8.2，溶氧保持在 5.0 mg/L 以上，系統(tǒng)內(nèi)各水處理單元間差異不顯著(P>0.05)。二級固定床生物凈化池(SIW)養(yǎng)殖水體中的 NH4+-N 和 NO2–-N 質(zhì)量濃度均顯著低于一級固定床凈化池(FMW)和養(yǎng)殖水池(PC)處理組(P<0.05)，其質(zhì)量濃度分別在 0.85 和 0.21mg/L，F(xiàn)MW 與 PC 處理組水體中 NH4+-N 和 NO2–-N 的質(zhì)量濃度差異不顯著(P>0.05)。不同水處理單元的 NO3–-N、硅 (Si) 、 TN 、 總 磷 (TP) 的質(zhì)量 濃 度 差 異 不 顯 著(P>0.05)。結(jié)果表明，不同生物凈化處理對降低 NH4+-N和 NO2–-N 質(zhì)量濃度具有顯著差異。
2.2 養(yǎng)殖系統(tǒng)菌群測序結(jié)果
經(jīng) 16S rDNA 基因 V4 片段 Illumina MiSeq 測序并優(yōu)化質(zhì)控后，21 個微生物樣本共得 1 296 349 條有效序列，平均每個樣本 61 731 條，長度主要在 201~300 bp 之間，平均為 255 bp�；� 97%相似性水平劃分 OTUs 的稀釋曲線結(jié)果顯示，每個樣本測序深度超過 50 000 條 reads，且曲線趨于平緩，表明對蝦工廠化養(yǎng)殖系統(tǒng)的微生物測序深度已接近實(shí)際菌群情況，滿足下一步分析需求。
2.3 微生物豐富度和多樣性分析
基于對蝦工廠化養(yǎng)殖系統(tǒng)菌群 OTUs 繪制 Venn圖，用于分析各組 OTU 的相關(guān)性。結(jié)果顯示，所有的微生物樣品中共鑒定出 8276 個 OTU，所有的樣品共有的 OTU 為 183 個。生物凈化載體樣品(FMB、SIB)處理組中獨(dú)有 OTU 數(shù)高于水體樣品(FMW、SIW)，其中 SIB 處理組最高(P<0.05);對蝦 LVT 處理組的獨(dú)有 OTU 數(shù)量顯著高于水體樣品(FMW、SIW)(P<0.05)。為了評估不同處理間微生物群落的 α 多樣性，分析了 Chao1、Shannon 和 Simpson 指數(shù)，結(jié)果顯示，SIB 處理組的 Chao1 指數(shù)、Shannon 指數(shù)顯著高于對蝦 LVT 處理組的指數(shù)(P<0.05) 。
2.4 對蝦循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)菌群結(jié)構(gòu)分析
所有微生物樣品中共鑒定出 46 個細(xì)菌門，其中水體和蝦腸道中的優(yōu)勢門不同。水體(FMW、SIW、PC)中優(yōu)勢菌為變形菌門(Proteobacteria)、擬桿菌門(Bacteroidetes)和放線菌門(Actinobacteria)，生物凈化載體中優(yōu)勢菌為變形菌門、擬桿菌門、放線菌門和浮霉菌門(Planctomycetes)，而對蝦腸道優(yōu)勢菌為變形菌門、擬桿菌門和厚壁菌門(Firmicutes)。
不同生物凈化載體(FMB 和 SIB)中浮霉菌門以及硝化螺旋菌門的豐度顯著高于其他處理組(P<0.05);對蝦腸道(LVT)中變形菌門和厚壁菌門豐度顯著高于水體和生物凈化載體(P<0.05)，而放線菌門豐度顯著低于水體和生物凈化載體(P<0.05)。在已鑒定的 947 個屬中，可以看出某些菌屬豐度在水體、生物凈化載體和對蝦腸道中存在明顯差異。
例如，弧菌屬(Vibrio)在生物凈化載體中豐度較低，而在水體(FMW、SIW)和腸道中豐度較高。從熱圖中可以看出，一級凈化水體中的弧菌屬的豐度高于二級凈化水體，而二級凈化水體高于養(yǎng)殖水體，浮霉菌屬(Planctomyces)的豐度在生物凈化載體樣品中比在水體和蝦腸道中要高，乳酸桿菌屬(Lactobacillus)的豐度在對蝦腸道的豐度最高，在水體中豐度最低，但在水體中含量極低。FMW、SIW、FMB 和 SIB 處理組中分枝桿菌屬(Mycobacterium)的豐度均高于腸道，腸道中的短波單胞菌屬(Brevundimonas)的豐度高于水體(FMW、SIW)和生物凈化載體樣品(FMB、SIB)中的豐度，LVT 處理組中潘多拉菌屬(Pandoraea)和葉桿菌屬(Phyllobacterium)的豐度高于水體和生物凈化載體。
3 討論
生物凈化在對蝦工廠化循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)中具有重要的作用(徐如衛(wèi)等, 2015)。本研究通過對比養(yǎng)殖水體和生物凈化載體上的細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)組成發(fā)現(xiàn)，二者的細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)組成基本一致。目前，在人工水產(chǎn)養(yǎng)殖系統(tǒng)中，由于放養(yǎng)密度高，投喂的飼料和糞便造成水中有毒的氨氮和亞硝酸鹽濃度上升，水體中的硝化細(xì)菌通過硝化作用可將氨轉(zhuǎn)變?yōu)閬喯跛�、將亞硝酸轉(zhuǎn)變?yōu)橄跛幔虼讼趸?xì)菌在循環(huán)水系統(tǒng)扮演著十分重要的角色(安曉宇, 2010)。
本研究的各級生物濾池中亞硝酸鹽含量水平相差不大，其濃度無明顯的積累現(xiàn)象，養(yǎng)殖系統(tǒng)氨氮和亞硝酸鹽濃度相對較低，且均在凡納濱對蝦安全養(yǎng)殖范圍內(nèi)，循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)中水質(zhì)狀況良好。微生物作為水生生態(tài)系統(tǒng)的重要組成部分，有助于保持水質(zhì)的穩(wěn)定和水生動物的健康狀況(Raul et al,2003)。對蝦對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收依賴于腸道微生物群的穩(wěn)定性，其失衡將直接影響到投喂飼料的利用、水產(chǎn)養(yǎng)殖環(huán)境的污染增加等問題(郁維娜等, 2018)。
因此，了解蝦類養(yǎng)殖生態(tài)系統(tǒng)的微生物特征，建立有效的微生物調(diào)控策略，對于對蝦工廠化養(yǎng)殖具有重要的作用。本研究中發(fā)現(xiàn)變形菌門、放線菌門和擬桿菌門是養(yǎng)殖水體樣品和生物凈化載體樣品中共同的優(yōu)勢細(xì)菌門類，這與以前對竺山灣和湖泊水體的浮游細(xì)菌的研究結(jié)果一致(Eiler et al, 2004; Tamaki et al, 2005; 薛銀剛等, 2018)，也與譚八梅等(2021)發(fā)現(xiàn)的遼寧長海刺參養(yǎng)殖池塘水體菌群同季節(jié)第一優(yōu)勢菌門均為變形菌門，次優(yōu)勢菌門為擬桿菌門相一致。
且變形菌門在腸道中的豐度高于在水體和生物凈化載體中，變形菌門是一種多功能細(xì)菌，在廢水中具有很高的豐度，能夠去除氮和磷，降解有機(jī)物和減少化學(xué)需氧量(Cottrell et al, 2000; Klase et al, 2019)。本實(shí)驗(yàn)中，變形菌門在腸道中的豐度高于水體，生物凈化載體中豐度最低;放線菌可降解有機(jī)物，包括淀粉、蛋白質(zhì)等大分子，并產(chǎn)生抗生素等抗菌物質(zhì)(Wexler, 2007;Zothanpuia et al, 2018)。
本研究中，水體中放線菌門豐度很高，而在對蝦腸道內(nèi)含量較低，有利于養(yǎng)殖水體有機(jī)物和氮的分解。擬桿菌門包括擬桿菌綱、黃桿菌綱和鞘脂桿菌綱三大類，其中擬桿菌綱主要存在于動物腸道和糞便中，可有效促進(jìn)碳水化合物的代謝(Shin et al, 2015);而黃桿菌綱主要存在于水生環(huán)境中，鞘脂桿菌綱的重要類群為噬胞菌屬(Cytophaga)，在海洋細(xì)菌中占有較大比例，可降解纖維素。本研究中，擬桿菌門在水體、生物凈化載體和腸道中的豐度差別不明顯，但可以看出在養(yǎng)殖水體中含量較高。
4 結(jié)論
生物凈化在凡納濱對蝦循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)中的應(yīng)用可降低對蝦循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)中 NH4+-N 和 NO2–-N 質(zhì)量濃度，有效調(diào)控養(yǎng)殖水體水質(zhì)指標(biāo)。水體、生物凈化載體以及對蝦體內(nèi)的優(yōu)勢菌群不同，變形菌和擬桿菌在水體、生物凈化載體和腸道中均占優(yōu)勢，而浮霉菌主要聚集于生物凈化載體，厚壁菌主要定植在腸道中，放線菌主要存在于水中。不同養(yǎng)殖環(huán)境微生物種類分布特征可為對蝦循環(huán)水養(yǎng)殖微生物資源開發(fā)和養(yǎng)殖水質(zhì)調(diào)控提供理論依據(jù)。
參 考 文 獻(xiàn)：
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作者：宮 晗 1,2 陳 萍 2① 秦 楨 2,3 劉 洋 2,4高 煥 1,2 李吉濤 2 李 健 2 朱建新 2
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